微生物限度检测仪在实验前后的一系列操作将供试品注入微生物限度培养器内，通过检验仪自带内置隔膜液泵负压抽滤，将供试品中微生物截留在滤膜上，用取膜器取出滤膜，转移至配置好的固体培养基上，菌面朝上，平贴。盖上盖子形成封闭的培养盒，置于相应的恒温培养箱内培养并计数。

　　微生物限度检查应在环境洁净度级下的局部洁净度级的单向流空气区域内进行。检验全过程须严格遵守操作，防止再污染。单向流空气区域、工作台面及环境应定期按《医药工业洁净室(区)悬浮粒子、浮游菌和沉降菌的测试方法》的现行国家标准进行洁净度验证。一、实验前1.实验用工器具的准备：检测过程中用到的玻璃平皿需灭菌(湿热灭菌℃、30分钟或干热灭菌℃、2小时)备用；剪刀、镊子等需先用纱布包好，外包牛皮纸包好扎紧，灭菌(湿热灭菌℃、30分钟)；移液管、qiang头等用报纸包好扎紧，灭菌(湿热灭菌℃、30分钟)。2.培养基及稀释液的准备：根据检验样品，计算出培养基与稀释液的用量，按照比例进行配置，包好，根据培养基与稀释液的属性，进行湿热灭菌，备用。3.洁净服准备：将当天所用洁净服放入灭菌锅中进行灭菌，备用；或使用已灭菌且在有效期内的洁净服。4.确保实验洁净区域通风，观察洁净室各个规定区域的压差是否符合规定，若不符合，及时通知设备部门，进行调整。

二、实验中1.将实验所需的平皿、培养基、工器具、稀释液放入传递窗中，打开紫外灯，照射30分钟。2.进入洁净区域，手清洁消毒，换上洁净服，进入检查室，打开洁净工作台通风，用消毒剂擦拭台面，取出传递窗中照射后物品，按照使用先后顺序置于洁净工作台上，摆好后紫外照射30分钟，人员退出检查室，紫外照射结束后，继续通风30分钟，检测人员方可进入检查室进行实验。3.实验过程中需点酒精灯，拆开灭菌后包好的培养基外层，在近火焰处轻微灼烧培养基瓶口，打开瓶盖，倾倒培养基至灭菌后的平板中，待冷凝后使用。三、实验后1.清洁及卫生：做完实验后，用消毒剂对操作台面进行擦拭消毒，待实验培养物和实验废弃物传出洁净区域后，使用纯化水对地面进行清洁。2.培养及结果观察：需氧菌平板应在30-35℃下，培养3-5天，霉菌与酵母菌平板应在20-25℃下，培养5-7天，空白与阴性对照应生长。