绿色植物中叶绿素含量是测定植物所需氮含量的重要因素，是植物进行光合作用的关键因素，因此对植物的生理学研究也是个重要的考核指标。在我们研究某样品的生长状况时需要了解叶绿素对于样品生长的影响，而叶绿素测量一般采用叶绿素测定仪来进行。

叶绿素测定仪可以即时测量植物的叶绿素相对含量（单位SPAD）或绿色程度、叶面温度，从而解植物真实的硝基需求量并且了解土壤硝基的缺乏程度或是否过多地施加了氮肥。可以通过此款仪器来增加氮肥的利用率，并可保护环境。可广泛应用于农林相关科研单位和高校对植物生理指标的研究和农业生产的指导。

叶绿素测定仪检测原理：

根据叶绿体色素提取液对可见光谱的吸收，利用分光光度计在某一特定波长测定其吸光度，即可用公式计算出提取液中各色素的含量。根据朗伯—比尔定律，某有色溶液的吸光度A与其中溶质浓度C和液层厚度L成正比，即A=αCL式中：α比例常数。当溶液浓度以百分浓度为单位，液层厚度为1cm时，α为该物质的吸光系数。各种有色物质溶液在不同波长下的吸光系数可通过测定已知浓度的纯物质在不同波长下的吸光度而求得。如果溶液中有数种吸光物质，则此混合液在某一波长下的总吸光度等于各组分在相应波长下吸光度的总和。这就是吸光度的加和性。

今欲测定叶绿体色素混合提取液中叶绿素a、b和类胡萝卜素的含量，只需测定该提取液在三个特定波长下的吸光度A，并根据叶绿素a、b及类胡萝卜素在该波长下的吸光系数即可求出其浓度。在测定叶绿素a、b时为了排除类胡萝卜素的干扰，所用单色光的波长选择叶绿素在红光区的最大吸收峰。

叶绿素测定仪的使用说明：

检测步骤

1、首先将手持式叶绿素仪的测量头夹在叶片两端，按下测量头。

2、在使用手持式叶绿素仪校准过程中，测量头不夹样品，二个LED次序发光，被接收的光转换成电信号，光强度的比率被用来计算。

3、在手持式叶绿素仪的测量头夹住样品后，二个LED再次发光，通过叶片传输的光打到接收器上，被转换成电信号，传输光的强度比率被计算。

4、步骤1和2的值用于计算SPAD测量值，就可以分析出所测叶片的叶绿素含量。

5、手持式叶绿素仪很小巧，不会损坏被测物，独立操作，小巧美观，外出携带方便。因为通过它测定叶绿素含量来分析植物长势，缺乏的营养，所以它在所有植物生理仪器中有着重要地位，是一台非常重要的植物生理仪器，又名叶绿素仪、叶绿素含量测定仪、叶绿素检测仪等等。使用时按照上述方法操作，基本上不会出现什么太大的问题。

注意事项

1、测量面积仅为2mm/SPAN3mm，能够用来测量比较小的叶子，样品厚度可以达到1.2mm。中心线指示测量面积的中心。

2、用手指按住样品夹，直到发出“滴”的一声测量值出现在显示屏上为止。测量值会自动储存在内存中。

3、当直接在太阳光下利用仪器时，用身体给仪器遮住阳光，这样就不会影响测量结果。

4、不要企图去测量绝对厚的部分，如叶脉。如果测量的叶片有很多的叶脉，好的办法是进行几次测量并取平均值。

5、如果一系列的“滴滴”声和“---”闪现在显示屏上，就是错误的执行了测量步骤(样品夹没有完全密封，在测量没有完成之前样品夹被打开，或者样本太厚或太小)。

6、如果测量值出现小数点闪现、没有小数点或测量值大于50.0的情况，说明测量精度不能保证，请重新测量。

7、如果样品夹的发射或者接收窗口变脏或者有一些水，就不会有的测量结果。在测量前请先查看样品夹窗口是否清洁。