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前言
前情回顾:既往2篇文章菌菌探讨了mRNA加帽率相关以及polyA尾分布的检测方法,感兴趣的小伙伴可以跳转链接查看:mRNA质量分析系列Part1:基于RNaseH或核酶的加帽率检测方法;Part2:基于LC-MS或测序平台的polyA尾检测方法
言归正传,耀海生物mRNA质量分析系列Part3继续为大家分享:dsRNA的检测方法。
利用T7RNA聚合酶体外转录(IVT,InVitroTranscription)制备mRNA的过程,同时会产生短链RNA、双链RNA(dsRNA,double-strandedRNA)等副产物,其中dsRNA可被RIG-I样受体(RIG-Ilikereceptors,RLRs)识别,继而触发机体的天然免疫反应;另外,dsRNA可激活寡聚腺苷酸合成酶(OSA,oligoadenylatessynthesis),从而结合并激活RNaseL,导致mRNA发生降解。
以上生理机制提示dsRNA的残留量是mRNA药物的关键质量属性,IVT制备mRNA时,需尽可能去除dsRNA,以获得免疫原性较低的功能性mRNA,同时提高mRNA表达水平。
年BijoyitaRoy等发表在GeneticEngineeringBiotechnologyNews的一篇文章:UnderstandingandOver
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